检测限通常被定义为信号的峰值高度,该峰值高度比基线噪声高得多(至少3倍)。液相色谱的检测限很大程度上取决于系统配置(进样量、柱效和尺寸、保留时间等)。)和方法本身(样品处理或预浓缩、酶反应器的使用或衍生化等。).表1给出了一些典型的检测限,以说明什么是可行的。它并不总是最佳的检测限,因为它在很大程度上取决于许多方法的优化细节。
表1。没有预浓缩的典型检测限和标准。
例子 | 列(毫米) | 注入。(µL) | LOD (nmol/L) | MDA (fmole) |
儿茶酚胺 | 4.6 x 100 | 20 | 0.05 | 1 |
儿茶酚胺 | 1 x 100 | 4 | 0.05 | 0.2 |
碳水化合物的 PAD | 4 x 250 | 20 | 10 | 200 |
二维 LC 的 DNA 加合物 | 3 x 100 | 5 | 10 | 50 |
带有 IMER 的 ACh | 2 x 100 | 20 | 0.5 | 10 |
3NT 带反应器电池 | 1 x 50 | 10 | 0.5 | 5 |
VitK 与反应器细胞 | 2.1 x 50 | 20 | 0.3 | 6 |
具有梯度 LC 的酚类 | 4.6 x 300 | 20 | 5 | 100 |
缩写:PAD是脉冲安培检测,IMER是固定化酶反应器,3NT是3-硝基酪氨酸,ACh是乙酰胆碱,VitK是维生素k。改进可能包括优化:
样品预处理(如浓缩)
液相色谱参数(流动相、色谱柱、进样量、选择性等)。).
检测器设置(范围、电位等))
流动池参数(垫圈、工作电极)
噪声抑制
记住:没有选择性就没有敏感性。如果不优化检测选择性,很难提高检测灵敏度。在大多数生物基质(血液、尿液、脑脊液)的液相色谱分析中,色谱图中的干扰峰是获得较好检出限的限制因素。因此,必须优化灵敏度和选择性。